Este estudo foi delineado para investigar a presença de relação entre a intensidade de sinal em FLAIR e níveis de citocinas, óxido nítrico (NO) e glutamato no hipocampo de pacientes com epilepsia do lobo temporal refratária, associada com esclerose mesial (TLE-MTS). Vinte e nove pacientes foram selecionados através de análise clínica e de ressonância magnética (RM) que foram submetidos a cortico-amigdalo-hipocampectomia para o controle das crises. Os níveis de glutamato foram avaliados por HPLC, as citocinas TNFα e IL1β por ELISA e os níveis de NO via NO system. Avaliamos também por imuno-histoquímica a expressão de IL1β e CD45 em tecidos controles e com esclerose. Tecido controle foi obtido após autópsia de indivíduos mortos sem disfunções inflamatórias e neurológicas (n=10). A concentração de glutamato se mostrou reduzida no tecido TLE-MTS (p<0,001) sugerindo aumento na liberação desse neurotransmissor. TNFα e IL1β também apresentaram níveis elevados no hipocampo dos pacientes (p<0,05), demonstrando um processo inflamatório crônico. Houve uma correlação linear positiva entre a intensidade do sinal em FLAIR e os níveis de NO e IL1β. Em contraste, uma correlação linear negativa foi encontrada entre a intensidade do sinal em FLAIR e níveis de glutamato no hipocampo com esclerose. Infiltrado linfocitário hipocampal também foi visualizado pela imuno-marcação com CD45 em pacientes com TLE-MTS. Esses dados mostraram uma associação entre alteração de sinal na RM e marcadores inflamatórios em pacientes com TLE-MTS.

We investigated a relationship between the FLAIR signal found in mesial temporal sclerosis (MTS) and inflammation. Twenty nine patients were selected through clinical and MRI analysis and submitted to cortico-amygdalo-hippocampectomy to seizure control. Glutamate, TNFα, IL1, nitric oxide (NO) levels and immunostaining against IL1β and CD45 was performed. Control tissues (n=10) were obtained after autopsy of patients without neurological disorders. The glutamate was decreased in the temporal lobe epilepsy (TLE) -MTS group (p<0.001), suggesting increased release of this neurotransmitter. The IL1β and TNFα were increased in the hippocampus (p<0.05) demonstrating an active inflammatory process. A positive linear correlation between FLAIR signal and NO and IL1β levels and a negative linear correlation between FLAIR signal and glutamate concentration was found. Lymphocytes infiltrates were present in hippocampi of TLE patients. These data showed an association between hippocampal signal alteration and increased inflammatory markers in TLE-MTS.

A neurogênese no giro dentado tem atraído atenção já que ela ocorre na mesma região do hipocampo que o brotamento das fibras musgosas, na epilepsia do lobo temporal. Assim, submetemos ratos em desenvolvimento ao status epilepticus induzido (SE) por pilocarpine. Grupos foram submetidos em I-P9, II-P7, P8, P9; III-P17 e IV-P21. A neurogênese foi observada usando o protocolo do BrdU e confirmada por dupla marcação com pentraxina neuronal. Outros animais foram monitorados até P120 e seus cérebros analisados (Nissl e Timm). A neurogênese nos grupos P17 (p=0,007) e P21 (p=0,006) aumentaram. Entretanto, o P21 apresentou crises espontâneas e brotamento de fibras musgosas, na mesma região onde ocorreu a neurogênese, enquanto o grupo P17 apresentou somente aumento na neurogênese. Assim, nossos resultados sugerem que o fenômeno da neurogênese não está relacionado com o brotamento de fibras musgosas nem com o aparecimento de crises espontâneas e recorrentes no modelo da pilocarpina.

Neurogenesis in the dentate gyrus (DG) has attracted attention since abnormal supragranular mossy fiber sprouting occurs in the same region, in temporal lobe epilepsy. Thus, we submitted developing rats to pilocarpine-induced status epilepticus (SE) to study the relationship between neurogenesis and mossy fiber sprouting. Groups were submitted to SE at: I-P9, II-P7, P8 and P9, III-P17 e IV-P21. Neurogenesis was quantified using BrdU protocol and confirmed through double staining, using neuronal pentraxin. Other animals were monitored by video system until P120 and their brain was studied (Timm and Nissl staining). The neurogenesis at P17 (p=0.007) and P21 (p=0.006) were increased. However, only P21 group showed recurrent seizures and the mossy fiber sprouting in the same region, during adult life, while P17 did not. Thus, our results suggest that neurogenesis is not related to mossy fiber sprouting neither to recurrent spontaneous seizures in pilocarpine model.

Este trabalho teve como objetivo o estudo da regeneração nervosa através da contagem de neurônios comparando duas técnicas cirúrgicas no tratamento da perda de substância nervosa nos membros inferiores em 15 ratos. Inicialmente obteve-se tubo de veia de 12mm de comprimento retirado da jugular externa esquerda. A seguir, opera-se os dois membros inferiores, expondo o nervo tibial de cada lado e ressecando um segmento de 8 mm do nervo, simulando, ao mesmo tempo, a perda de substância e a obtenção do enxerto nervoso autógeno. A reparação da perda de substância do lado esquerdo consistiu numa enxertia convencional simples para a reparação de lesão nervosa por meio de sutura microcirúrgica. A do membro inferior direito foi pela tubulização com 8 mm de enxerto de músculo quadríceps denaturado com nitrogênio líquido coberto com veia jugular. Após quatro meses, os animais foram submetidos à nova cirurgia para exposição dos nervos tibiais ao marcador neuronal Fluoro Gold®. Após 48 horas, foram perfundidos e o segmento medular entre L3 e S1 foi removido e posteriormente cortado em secções de 40 µm. Houve contagem neuronal de todos os cortes e não foram verificadas diferenças estatísticas entre as duas técnicas cirúrgicas.

The purpose of this work was to study nervous regeneration through neurons counts by comparing two surgical techniques for addressing nervous gaps on 15 rats' lower limbs. Initially, a 12-mm long vein tube from the left outer jugular was obtained, and then both lower limbs are operated, exposing the tibial nerve at each side and performing a resection of an 8-mm nerve segment, at the same time simulating a gap and an autogenous nerve graft. Left gap repair consisted of a usual conventional graft for nervous injury repair by means of microsurgical suture. The gap repair on right lower limbs was made through quadriceps muscle, treated with liquid nitrogen, covered with an 8-mm tube of jugular vein. After four months, the animals were submitted to a new surgery for exposing tibial nerves to the Fluoro-Gold® neuronal marker. After 48 hours, the rats were perfused and medullar segment between L3 and S1 was removed and subsequently cut into 40µm sections. Neurons on all sections were counted, and no statistical differences were found between both surgical techniques.

O efeito do estado glicêmico sobre o desenvolvimento do status epilepticus (SE) foi estudado em animais de diferentes idades, submetidos ao modelo de epilepsia por pilocarpina. Grupos: I- Ratos com nove dias (P9): IA- Submetidos a 1SE; IB- Tratados com salina; IC- Hiperglicemia induzida; ID- Hiperglicemia induzida+SE; II- Ratos submetidos a 3 episódios consecutivos de SE em P7, P8 e P9; III- Ratos submetidos a 1SE em P17; IV- Ratos submetidos a 1SE em P21. Foram analisados no grupo I a morte celular hipocampal e a expressão do transportador de glicose GLUT3. Os resultados mostraram haver normoglicemia nos grupos IA, IB e II, hipoglicemia no grupo III e hiperglicemia no grupo IV, sendo a glicemia durante o SE, idade dependente. A hiperglicemia induzida durante o SE em P9 protegeu neurônios hipocampais e os grupos IC e ID apresentaram expressão aumentada de GLUT3, mostrando aumento no consumo de glicose pelo hipocampo.

The effect of glycemic state on status epilepticus (SE) development was studied in animals of different ages, submitted to pilocarpine model of epilepsy. Groups: I- Rats with 9-day-old (P9): IA. Submitted to 1SE; IB. Saline-treated; IC. Induced- hyperglycemia; ID. Induced- hyperglycemia+SE; II- Rats submitted to three consecutive episodes of SE at P7, P8 and P9; III- Rats submitted to 1SE at P17; IV- Rats submitted to 1SE at P21. Hippocampal cell death and the expression of glucose transporter GLUT3 were analyzed in group I. The results demonstrated normoglycemia in the groups IA, IB and II, hypoglycemia in group III and hyperglycemia in group IV, showing that the glycemia during SE is age dependent. Induced hyperglycemia during SE in P9 protected the hippocampal neurons from death and both groups IC and ID presented increased GLUT3 expression, showing high glucose consumption by the hippocampus.

PURPOSE: The aim of this research was to study the effects of treatment with melatonin and N-acetilserotonin in the development of pilocarpina model of epilepsy in adult male rats. METHODS: Part I - The animals were divided in 4 groups: SALINE - animals that received only saline; SE - animals submitted to status epilepticus (SE); NAS + SE - animals that received pre-treatment with N-acetylserotonin and were submitted to SE and MEL + SE - animals that received pre-treatment with melatonin and were submitted to SE. Part II - The animals were divided in 6 groups: SALINE - animals that received only saline; SE - animals submitted to status epilepticus (SE); PX + SE - animals submitted to pinealectomy and to SE 7 days later; SH + SE - animals submitted to sham-surgery and to SE 7 days later; SE + NAS - animals submitted to SE and treated with N-acetylserotonin (2,5 mg/kg), 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 12 h, 24 h, 36 h and 48 h after the SE and SE + MEL - animals submitted to SE and treated with melatonin (2,5 mg/kg), 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 12 h, 24 h, 36 h and 48 h after the SE. Following the treatment the animals were continuously video-recorded for 60 days. The behavioral parameters were observed: latency for the SE in minutes, latency for the first spontaneous seizures (ie, duration of the silent period), number of spontaneous seizures during the chronic period and mortality. Five animals per group were perfused for neo-Timm assay. RESULTS: Part I - The animals treated with melatonin and N-acetylserotonin presented an increased of latency for the status epilepticus and decreased number of spontaneous seizures during the chronic period when compared to SE group. The mortality was reduced 100% in animals treated with melatonin and theses animals presented a minor mossy fibers sprouting. Part II - The latency for the first spontaneous seizures and mortality were similar in all groups. The animals treated with melatonin presented a decreased number of spontaneous seizures during the chronic period when compared to PX + SE group and a minor mossy fibers sprouting when compared to SE, SH + SE and PX + SE groups. CONCLUSION: Our data show that the melatonin and N-acetylserotonin have an important neuroprotector effect in the epileptogenesis and in the control of seizures during the chronic period of the pilocarpina model of epilepsy induced by pilocarpina.

OBJETIVO: Buscando elucidar os efeitos positivos do exercício físico aeróbio na epilepsia, analisamos a influên-cia da pinealectomia em animais com epilepsia do lobo temporal (ELT) induzida por pilocarpina e submetidos a um programa de exercício físico. MATERIAL E MÉTODOS: Quarenta ratos Wistar adultos foram usados: 1) PX + CRÔNICO - pinealectomizados (PX) com ELT (CRÔNICO) sem exercício (n = 9); 2) PX + CRÔNICO + EXERCÍCIO - submetidos a um programa de exercício físico aeróbio (n = 5); 3) CRÔNICO - sem exercício (n = 8); 4) CRÔNICO + EXERCÍCIO (n = 8); 5) CTRL - controle sem epilepsia, sem exercício (n = 5); 6) CTRL + EXERCÍCIO (n = 5). O programa de exercício físico consistiu de corrida em esteira, 5 dias/semana (30 dias) a 60% VO2max. Os métodos de Nissl e neo-Timm foram utilizados. RESULTADOS: A pinealectomia aumentou a freqüência de crises em animais com epilepsia. Foi observada uma diminuição da morte neuronal e do brotamento de fibras musgosas em animais com epilepsia, submetidos ao programa de exercício físico. Entretanto, este programa não alterou a freqüência de crises em animais pinealectomizados.

OBJECTIVE: To better clarify the positive effects of physical exercise in the epilepsy, we analyzed the effect of the pinealectomy in animals with temporal lobe epilepsy (TLE) induced by pilocarpine submitted to an aerobic physical program. MATERIAL AND METHODS: Forty adults Wistar rats were used: 1) PX + CHRONIC - Pinealectomized animals (PX) with TLE (CHRONIC) without exercise (n = 9); 2) PX + CHRONIC + EXERCISE - submitted to an aerobic physical exercise program (n = 5); 3) CHRONIC - without exercise (n = 8); 4) CHRONIC + EXERCISE (n = 8); 5) CTRL - control without exercise (n = 5); 6) CTRL + EXERCISE (n = 5). The physical exercise program consisted of 1 hour of treadmill, 5 days/week, during 30 days, at 60% VO2max. The Nissl and neo-Timm methods were used. RESULTS: The pinealectomy increased the frequency of seizures in animals with epilepsy. It was observed a reduction of the neuronal death and mossy fiber sprouting in the animals with epilepsy submitted to an aerobic physical exercise program. However, the physical exercise program did not modify the frequency of the seizures in the pinealectomized animals.